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维(wei)生素AK2（发酵(jiao)法法）液质色谱(pu)阐发体例(卫计委2016第9号)

A.4 复合(he)维生素B12₂的(de)含(han)量(liang)的(de)分析

A.4.1生化试剂和文件

A.4.1.1维(wei)CK₂规范了品（七(qi)烯甲萘醌(kun)，MK-7）。

A.4.1.2异丙(bing)醇：阐发纯。

A.4.1.3甲醇：色谱纯。

A.4.2检测仪器和(he)设备

A.4.2.1色(se)谱(pu)仪(yi)色(se)谱(pu)仪(yi)。

A.4.2.2紫外线(xian)光查(cha)重器：可变气门正时主(zhu)波(bo)长。

A.4.2.3资(zi)料防(fang)(fang)范指标体系：色谱每日任务站或资(zi)料防(🌳fang)(fang)范机。

A.4.3对比色谱要素(su)

保举的离(li)子ꦺ交换柱及(ji)更优(you)支配必(bi)要条(tiao)件下(xia)列表A.1，任何能(neng)触达划(h🧸ua)一和平分手能(neng)力的离(li)子交换柱和色谱支配必(bi)要条(tiao)件都会采取(qu)。

A.1离子交换柱和色谱调控原则

A.4.4阐发操作步骤(zhou)

A.4.4.1 试件材料(liao)液(ye)体外理(li)

密实称💟取坯料(li🌞ao)尽(jin)量（至(zhi)0.001 g）于10 mL使用(yong)量瓶(ping)中，干预异丙醇超声心动图30 min，用(yong)异丙醇定容至(zhi)读数(shu)，摇匀，过0.45 μm滤膜，得上样钢材拉伸试验。

A.4.4.2 正确品(pin)溶剂制备

密(mi)封(feng)称取(qu)七烯甲萘醌标准品(pin)有效，用异丙醇(chunܫ)消融(ron🔯g)并定容，调(diao)配成浓硫(liu)酸(suan)浓度为20 μg/mL的规范起来(lai)品(pin)氢氧化钠溶液。

A.4.4.3  试(shi)件旋光度的测定

用规(gui)则品和制样悬浊(zhuo)液10 µL传递色谱(pu)仪色谱(pu)仪中法测(ce)定(ding)，以抹去之(🍌zhi)前定(ding)性处理(li)，峰使用(yong)面(mian)积外标法律(lv)规定(ding)的(de)量。

A.4.5作品比较(jiao)

VK₂的含氧量w，第一(yi)单元为微克(ke)每克(ke)(μg/g)，按式（A.1）斤斤计较：

   …………………&h🦩ellip;…………………………（A.1）

式中(zhong)：

A₁——试板中各种维(wei)生素K1₂（七烯甲萘醌）分(fen)别峰(feng)户型(xing)面积；

A₂——规范化品中复(fu)合(he)维生素K1₂（七烯甲萘(nai)醌）相对应峰总面积；

c₁——进样(yang)实(shi)验室(shi)管理标准品(pin)中维生素BK₂（七烯甲萘醌）的浓度(du)值，第一(yi)单元为(wei)微克每毫升（µg/mL）；

V₁——供(gong)试制样定(ding)容密度，摸块为毫升（mL）；

m₁——试件(jian)的品行(xing)，第一(yi)单(dan)元为克（g）。

實驗(yaꩵn)课题(ti)以相平行测量课题(ti)的数(shu)学计算(suan)平滑数(shu)值为(wei)准。在(zai)反复不断地性要素下达成(cheng)的两回(hui)自力(li)测量课题(ti)的差(cha)值面积不多于数(shu)学计算(suan)🀅平滑值的10 %。

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